來源：西安海研生物科技公司 發(fā)布時間：2019-03-30
目前我國對生活飲用水進行衛(wèi)生學評價 ,檢測的微生物指標主要有大腸菌群、耐熱大腸菌群、大腸埃希菌 ,這類指標是糞便污染的指示菌。傳統(tǒng)方法為多管發(fā)酵法 ,其檢測周期較長 ,需 2 ～5 d,陽性結果需驗證試驗 ,使得實驗操作步驟較為繁瑣 ,不能對生活飲用水的衛(wèi)生學狀況做出快速評價 ,特別是在抗震救災特殊時期 ,如能實現(xiàn)微生物指標的實時監(jiān)測 ,將地支持抗震救災工作的順利實施 ,有力保障廣大災區(qū)人民群眾生活飲用水的供水安全。因此 , 酶底物法作為一種快檢方法 ,其快速簡便的特點可以較好的彌補傳統(tǒng)方法的不足。
酶底物法 （ enzyme substrate technique）的原理是 :利用大腸菌群細菌能產生β2半乳糖苷酶 （β2D2galactosidase）分解 ON 2PG （O rtho2 nitrophenyl2β2D2galactopyranoside ） 使培養(yǎng)液呈黃色 ,檢測水樣中是否含有大腸菌群。利用大腸埃希菌產生 β2葡萄 糖 醛 酸 酶 （ β2glucuronidase ） 分 解 MUG （ 42 methyl2umbelliferyl2β2D2glucuronide）使培養(yǎng)液在波長 366 nm紫外光下產生藍色熒光 , 檢測水樣中是否含有大腸埃希菌。酶底物法有商品化試劑供應 ,實驗操作簡便 ,無需確認試驗 ,可同時檢測水樣中大腸菌群和大腸埃希菌。如果改變培養(yǎng)溫度 ,還可檢測耐熱大腸菌群。該方法檢測周期短 , 18 ～24 h 即可報告結果。可見該方法大的特點是節(jié)省了時間和人力。
酶底物法應用的優(yōu)勢：
精確可信
使用MPN法進行定量檢測，可直接檢測100毫升水揚中0-2419MPN目標細菌
精確檢出100ml水樣中單個的活性大腸桿菌群和大腸埃希氏菌，假陰性低
每個單位試劑可抑制上百萬個異養(yǎng)細菌，假陰性低
無需驗證，精確性高于濾膜法及多管發(fā)酵法
符合標準GB/T5750.12-2006《生活飲用水檢驗標準》
簡單快捷
檢測時間不超過24小時，無需驗證試驗
簡單培訓就能輕松使用，手工操作少于一分鐘
不會因為過濾阻塞（濾膜法）或異養(yǎng)細胞的干擾（多管發(fā)酵法）而產生數據誤差
無需玻璃器皿清洗及菌落計數，減輕實驗人員工作量
適用于大量樣品的批量快速檢測
酶底物法的主要缺點
培養(yǎng)基成分復雜 ,實驗室配制困難 ,目前只有進口試劑可供選擇 ,使得檢測成本大為提高。如果能實現(xiàn)試劑的國產化 ,相信其應用會得到推廣。
對于污染比較嚴重的生活飲用水 ,酶底物法的定量檢測能力不如多管發(fā)酵法。遇到這類情況時如需應用酶底物法 ,則只能先將水樣適當稀釋后再進行檢測。
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